我們(men)免疫分析(xi)中(zhong)出現問(wen)題(ti)的(de)(de)(de)(de)一(yi)個常見原因是干(gan)擾(rao)性(xing)(xing)(xing)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)，如眾所周知(zhi)的(de)(de)(de)(de)人(ren)抗(kang)(kang)(kang)鼠抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)、一(yi)般的(de)(de)(de)(de)抗(kang)(kang)(kang)動物(wu)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)、嗜異性(xing)(xing)(xing)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)或(huo)(huo)類風濕因子。有趣的(de)(de)(de)(de)是，由(you)于今天的(de)(de)(de)(de)治療性(xing)(xing)(xing)單克隆抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)藥物(wu)幾乎(hu)完全(quan)是人(ren)源(yuan)化(hua)的(de)(de)(de)(de)，所以(yi)真正的(de)(de)(de)(de)的(de)(de)(de)(de)流行率正在(zai)穩步下(xia)降(jiang)。抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)引(yin)起的(de)(de)(de)(de)干(gan)擾(rao)在(zai)未來仍將具有高度的(de)(de)(de)(de)臨(lin)床相關性(xing)(xing)(xing)，并且似乎(hu)進一(yi)步增加患(huan)病率。一(yi)般來說，這些(xie)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)干(gan)擾(rao)主要發(fa)生在(zai)夾心法的(de)(de)(de)(de)免疫分析(xi)中(zhong)，即基于捕(bu)獲抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)和檢測抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)。干(gan)擾(rao)性(xing)(xing)(xing)抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)可以(yi)交聯捕(bu)獲抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)和檢測抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)，導致(zhi)分析(xi)中(zhong)的(de)(de)(de)(de)高讀數，從(cong)而導致(zhi)假陽性(xing)(xing)(xing)結果。或(huo)(huo)者，它們(men)可以(yi)阻止抗(kang)(kang)(kang)原與(yu)檢測抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)的(de)(de)(de)(de)結合，甚至(zhi)引(yin)起檢測抗(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)的(de)(de)(de)(de)聚集，導致(zhi)假陰性(xing)(xing)(xing)結果。

我們(men)在(zai)免疫診斷試劑(ji)研發過程中(zhong)，往(wang)往(wang)會(hui)加(jia)入阻斷劑(ji)，讓整個反應體系靈敏(min)度更優，今天就來聊(liao)聊(liao)阻斷劑(ji)的(de)(de)作用原理、它們(men)的(de)(de)性質特(te)點和如何選擇使用他們(men)。每次檢(jian)測(ce)時阻斷劑(ji)的(de)(de)最有效濃度也(ye)必須仔細(xi)滴定(ding)。對于給定(ding)的(de)(de)分析和干擾樣品組合，必須進行非常嚴格的(de)(de)測(ce)試，才能找到合適的(de)(de)HAMA阻斷劑(ji)。

一，原理概念

阻(zu)斷(duan)劑(ji)(ji)(ji)是(shi)藥理學術語(yu)，一(yi)般指(zhi)的(de)就(jiu)是(shi)拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)。指(zhi)能與受(shou)體(ti)結(jie)(jie)合(he)(he)，并能阻(zu)止激動劑(ji)(ji)(ji)產生(sheng)效(xiao)應的(de)一(yi)類配(pei)體(ti)物(wu)(wu)質。拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)對相應受(shou)體(ti)有(you)(you)(you)親和性(xing)，但沒(mei)有(you)(you)(you)效(xiao)能，從(cong)而抑制了激動劑(ji)(ji)(ji)對受(shou)體(ti)的(de)作用。拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)可以結(jie)(jie)合(he)(he)受(shou)體(ti)的(de)活性(xing)位點，也可以結(jie)(jie)合(he)(he)別構位點，甚(shen)至單獨結(jie)(jie)合(he)(he)通常沒(mei)有(you)(you)(you)生(sheng)物(wu)(wu)調節作用的(de)位點來達到效(xiao)果。拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)和受(shou)體(ti)結(jie)(jie)合(he)(he)性(xing)質不同，所以結(jie)(jie)合(he)(he)時(shi)間(jian)有(you)(you)(you)長有(you)(you)(you)短(duan)，結(jie)(jie)合(he)(he)的(de)可逆性(xing)也有(you)(you)(you)不同。

它分為競爭性(xing)拮(jie)抗劑(ji)和非競爭性(xing)拮(jie)抗劑(ji)等類型。大(da)部分藥物(wu)拮(jie)抗劑(ji)都與(yu)內源性(xing)配體或底物(wu)競爭受體結合位(wei)點(dian)來達到效(xiao)果。

受體是可被配體結合而激活的大型蛋白質分子。受體可以結合在細胞膜上，也可存在于細胞內部，比如在細胞核或線粒體中。受體在活性位點與配體以非共價鍵結合，一個受體上可以有多個結合不同配體的位點。配體和受體在活性位點或別構位點結合后，都可以調節受體的活性。拮抗劑可以通過結合活性位點、別構位點，或者單獨結合通常不參與生物調節的位點來產生效果。

（代寫層析、發光、膠體金、PCR注冊申報資料，私信聯系！周期短(duan)、價格低(di)、含發(fa)補(bu)）

二，性質選擇

1.效能和效價強度

根據定(ding)義(yi)，拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)沒有激活(huo)所(suo)結合的(de)(de)(de)受體的(de)(de)(de)效(xiao)能(neng)，，因為一旦二(er)者結合起來，拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)就(jiu)抑(yi)制了激動(dong)劑(ji)(ji)(ji)(包括(kuo)部分激動(dong)劑(ji)(ji)(ji)和反(fan)激動(dong)劑(ji)(ji)(ji))的(de)(de)(de)功能(neng)。在拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)功能(neng)評估中，使用(yong)量(liang)效(xiao)曲線量(liang)度一定(ding)濃(nong)(nong)度的(de)(de)(de)拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)抑(yi)制激動(dong)劑(ji)(ji)(ji)效(xiao)應的(de)(de)(de)能(neng)力。通常(chang)把拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)的(de)(de)(de)EC50值(zhi)(zhi)作為它的(de)(de)(de)效(xiao)價強(qiang)度。EC50值(zhi)(zhi)是指(zhi)能(neng)抑(yi)制激動(dong)劑(ji)(ji)(ji)最大生物(wu)反(fan)應一半(ban)的(de)(de)(de)拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)濃(nong)(nong)度。EC50非常(chang)有助于比較有相似效(xiao)能(neng)和量(liang)效(xiao)曲線的(de)(de)(de)藥(yao)品的(de)(de)(de)效(xiao)價強(qiang)度。這個值(zhi)(zhi)越(yue)(yue)低(di)(di)，拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)的(de)(de)(de)效(xiao)價強(qiang)度就(jiu)越(yue)(yue)好，抑(yi)制生物(wu)反(fan)應所(suo)需(xu)的(de)(de)(de)藥(yao)物(wu)濃(nong)(nong)度就(jiu)越(yue)(yue)低(di)(di)，副作用(yong)也越(yue)(yue)少。

2，親和性及其測定

拮(jie)抗(kang)劑(ji)(ji)對受(shou)(shou)體(ti)(ti)的(de)(de)親和(he)(he)性(xing)就是它與(yu)受(shou)(shou)體(ti)(ti)結合的(de)(de)能力，以Ki表(biao)示，決(jue)定了拮(jie)抗(kang)劑(ji)(ji)抑制作(zuo)用(yong)(yong)的(de)(de)長(chang)短。親和(he)(he)性(xing)可(ke)(ke)由(you)Schild回歸(gui)(gui)用(yong)(yong)實驗測定，而若拮(jie)抗(kang)劑(ji)(ji)為競爭(zheng)性(xing)，親和(he)(he)性(xing)也可(ke)(ke)由(you)鄭-普魯薩(sa)福方程(Cheng-Prusoff equation)確(que)(que)定。Schild回歸(gui)(gui)可(ke)(ke)確(que)(que)定拮(jie)抗(kang)劑(ji)(ji)的(de)(de)種(zhong)類，并(bing)且測定不受(shou)(shou)激動劑(ji)(ji)親和(he)(he)性(xing)、效(xiao)能和(he)(he)濃度的(de)(de)影響，不過要(yao)注意測定時(shi)需達到平衡，并(bing)要(yao)考慮受(shou)(shou)體(ti)(ti)脫敏效(xiao)應(ying)。但是Schild回歸(gui)(gui)無(wu)法(fa)測量(liang)有(you)多(duo)個效(xiao)應(ying)的(de)(de)拮(jie)抗(kang)劑(ji)(ji)，如會同時(shi)阻(zu)斷離子通道(dao)的(de)(de)競爭(zheng)性(xing)神經肌肉阻(zu)斷劑(ji)(ji)。Schild回歸(gui)(gui)需要(yao)比較有(you)無(wu)拮(jie)抗(kang)劑(ji)(ji)時(shi)EC50的(de)(de)比值。當拮(jie)抗(kang)劑(ji)(ji)劑(ji)(ji)量(liang)變化(hua)時(shi)，這個比值也跟著變化(hua)，由(you)此(ci)作(zuo)出雙對數圖(tu)，親和(he)(he)性(xing)常數Ki就是回歸(gui)(gui)直線與(yu)x軸的(de)(de)交點(dian)。

3，可逆性

很(hen)多拮抗劑(ji)像激動(dong)劑(ji)一樣(yang)都是可逆的(de)，它(ta)們和(he)受體(ti)的(de)結(jie)合速(su)率和(he)分離速(su)率遵循化學動(dong)力學。

不可逆(ni)拮(jie)抗(kang)劑(ji)(ji)與(yu)受體(ti)以共價鍵相結合，一般無法分離，所(suo)以其抑制作用取決于新(xin)受體(ti)的生成速率(lv)，例如(ru)酚芐明與(yu)α腎(shen)上(shang)腺(xian)(xian)素受體(ti)不可逆(ni)結合，阻(zu)止腎(shen)上(shang)腺(xian)(xian)素和去甲(jia)腎(shen)上(shang)腺(xian)(xian)素再與(yu)受體(ti)結合。受體(ti)失活通常導致量效曲線的最大效應降低，當(dang)有受體(ti)儲備時也會和非競爭性拮(jie)抗(kang)劑(ji)(ji)一樣產生曲線右(you)移。評(ping)估時的清洗常可區分非競爭性拮(jie)抗(kang)劑(ji)(ji)和不可逆(ni)拮(jie)抗(kang)劑(ji)(ji)，因為非競爭性拮(jie)抗(kang)劑(ji)(ji)是可逆(ni)的，清洗能恢(hui)復(fu)激動劑(ji)(ji)的效應。

不可逆競(jing)爭性拮(jie)抗(kang)劑(ji)也與(yu)激動劑(ji)競(jing)爭活(huo)性位(wei)點，但它與(yu)受(shou)體形成共價鍵的(de)(de)速(su)率取決于拮(jie)抗(kang)劑(ji)的(de)(de)親和力和反應(ying)(ying)活(huo)性。某(mou)些拮(jie)抗(kang)劑(ji)可能(neng)有一(yi)段特殊(shu)的(de)(de)可逆結合時(shi)期(qi)，在(zai)此期(qi)間拮(jie)抗(kang)劑(ji)按化學(xue)動力學(xue)所決定的(de)(de)速(su)率與(yu)受(shou)體自由(you)結合和分離。但是(shi)，一(yi)旦二者形成不可逆的(de)(de)化學(xue)鍵，受(shou)體即失活(huo)。在(zai)功能(neng)評估中(zhong)，競(jing)爭性拮(jie)抗(kang)劑(ji)對量效曲線的(de)(de)影(ying)響像非競(jing)爭性拮(jie)抗(kang)劑(ji)一(yi)樣，會(hui)使曲線右移，斜率減小，最大(da)反應(ying)(ying)降低。

三，分類

1，競爭性拮抗劑

競爭性拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)是(shi)與(yu)(yu)相(xiang)(xiang)應內源激(ji)(ji)動劑(ji)(ji)(ji)配體相(xiang)(xiang)互(hu)競爭相(xiang)(xiang)同(tong)(tong)受(shou)(shou)體活性位點的拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)。這(zhe)種拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)的分子(zi)結(jie)(jie)構與(yu)(yu)相(xiang)(xiang)應激(ji)(ji)動劑(ji)(ji)(ji)相(xiang)(xiang)似，但它與(yu)(yu)受(shou)(shou)體可逆結(jie)(jie)合后，非但不激(ji)(ji)活受(shou)(shou)體，而(er)(er)且(qie)阻止激(ji)(ji)動劑(ji)(ji)(ji)與(yu)(yu)該受(shou)(shou)體結(jie)(jie)合。拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)的效應大(da)(da)小(xiao)取決于(yu)激(ji)(ji)動劑(ji)(ji)(ji)的濃度和(he)親(qin)和(he)力。激(ji)(ji)動劑(ji)(ji)(ji)的濃度和(he)親(qin)和(he)力越高，與(yu)(yu)之(zhi)結(jie)(jie)合得受(shou)(shou)體就越多，產生相(xiang)(xiang)同(tong)(tong)抑制(zhi)作用所需(xu)的拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)濃度就越大(da)(da)。在(zai)做功效評(ping)估時，競爭性拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)可使量效曲線向右平移(yi)，而(er)(er)斜率和(he)最大(da)(da)效應不變。白細胞介(jie)素1族(zu)受(shou)(shou)體拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)IL-1Ra就是(shi)一種競爭性拮(jie)抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)。在(zai)體外診斷(duan)試(shi)劑(ji)(ji)(ji)免疫過程(cheng)中一般會選擇它作為添加劑(ji)(ji)(ji)。

（代寫層析、發光、膠體金、PCR注冊申報資料，私信聯系！周期短、價格低(di)、含發補）

2，非競爭性拮抗劑

非(fei)競爭(zheng)性(xing)(xing)拮抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)不(bu)(bu)與相(xiang)應(ying)(ying)激(ji)動(dong)劑(ji)(ji)(ji)競爭(zheng)相(xiang)同受(shou)體(ti)活性(xing)(xing)位點，但它對激(ji)動(dong)劑(ji)(ji)(ji)的(de)抑制(zhi)作(zuo)用無法消除。相(xiang)比(bi)競爭(zheng)性(xing)(xing)拮抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)只影(ying)響能產生(sheng)最大(da)反(fan)應(ying)(ying)的(de)激(ji)動(dong)劑(ji)(ji)(ji)劑(ji)(ji)(ji)量，而(er)不(bu)(bu)影(ying)響最大(da)反(fan)應(ying)(ying)的(de)強度，非(fei)競爭(zheng)性(xing)(xing)拮抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)減(jian)小了激(ji)動(dong)劑(ji)(ji)(ji)能產生(sheng)的(de)最大(da)反(fan)應(ying)(ying)。在量效(xiao)曲線中(zhong)，非(fei)競爭(zheng)性(xing)(xing)拮抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)使最大(da)效(xiao)應(ying)(ying)下降(jiang)，有時還(huan)使曲線右(you)移。曲線右(you)移是因為當受(shou)體(ti)儲(chu)備(bei)(亦稱空閑受(shou)體(ti))消耗完后拮抗(kang)(kang)劑(ji)(ji)(ji)才(cai)會產生(sheng)抑制(zhi)效(xiao)應(ying)(ying)。這種(zhong)不(bu)(bu)建議試劑(ji)(ji)(ji)，會大(da)大(da)提高(gao)免疫診斷試劑(ji)(ji)(ji)假陽。

非競爭性拮抗劑有兩種抑制機理。第一種是拮抗劑與受體的活性位點結合，這種結合幾乎不可逆。第二種是拮抗劑與受體的一個和活性位點不同的別構位點結合。這種拮抗劑雖然不與激動劑競爭活性位點，但它會導致受體構型改變。例如環噻嗪就是代謝型谷氨酸受體1的可逆非競爭性拮抗劑。

3，沉默拮抗劑

沉默拮抗劑(ji)是對(dui)受體沒(mei)有任何內(nei)在活性的(de)(de)競爭性拮抗劑(ji)。從(cong)某種程(cheng)度上說它(ta)們才是真正的(de)(de)拮抗劑(ji)。這個術語(yu)的(de)(de)出現是為了把(ba)它(ta)們和部分(fen)激動(dong)劑(ji)以及反激動(dong)劑(ji)區分(fen)開來。

4，部分激動劑

部分(fen)(fen)激(ji)(ji)動(dong)(dong)(dong)(dong)劑(ji)(ji)(ji)是(shi)對(dui)(dui)受(shou)體的(de)最(zui)大作用(yong)比完(wan)全激(ji)(ji)動(dong)(dong)(dong)(dong)劑(ji)(ji)(ji)小的(de)一(yi)類藥物。雖然它們(men)也是(shi)激(ji)(ji)動(dong)(dong)(dong)(dong)劑(ji)(ji)(ji)，但(dan)是(shi)在和(he)完(wan)全激(ji)(ji)動(dong)(dong)(dong)(dong)劑(ji)(ji)(ji)競(jing)爭時會(hui)降低完(wan)全激(ji)(ji)動(dong)(dong)(dong)(dong)劑(ji)(ji)(ji)對(dui)(dui)受(shou)體的(de)激(ji)(ji)活(huo)(huo)效應(ying)，從而起到拮抗劑(ji)(ji)(ji)的(de)作用(yong)。臨床(chuang)上(shang)，部分(fen)(fen)激(ji)(ji)動(dong)(dong)(dong)(dong)劑(ji)(ji)(ji)可以改善有(you)缺(que)陷的(de)機能而又不矯枉過(guo)正。讓(rang)受(shou)體接(jie)觸高濃(nong)度的(de)部分(fen)(fen)激(ji)(ji)動(dong)(dong)(dong)(dong)劑(ji)(ji)(ji)能保證不管完(wan)全激(ji)(ji)動(dong)(dong)(dong)(dong)劑(ji)(ji)(ji)濃(nong)度如何(he)，受(shou)體都有(you)較弱(ruo)但(dan)持續的(de)活(huo)(huo)性(xing)。另外，有(you)研究顯示(shi)部分(fen)(fen)激(ji)(ji)動(dong)(dong)(dong)(dong)劑(ji)(ji)(ji)能防(fang)止(zhi)重復接(jie)觸強效的(de)完(wan)全激(ji)(ji)動(dong)(dong)(dong)(dong)劑(ji)(ji)(ji)或拮抗劑(ji)(ji)(ji)常常帶來的(de)適應(ying)性(xing)調節機制(zhi)(zhi)。μ-阿(a)片(pian)受(shou)體的(de)部分(fen)(fen)激(ji)(ji)動(dong)(dong)(dong)(dong)劑(ji)(ji)(ji)丁丙諾(nuo)啡有(you)較弱(ruo)的(de)嗎啡活(huo)(huo)性(xing)，臨床(chuang)上(shang)用(yong)于控制(zhi)(zhi)疼痛的(de)鎮痛藥，以及代(dai)替美沙酮治療(liao)鴉(ya)片(pian)成癮。

5，反激動劑

反(fan)激(ji)(ji)動劑(ji)和拮(jie)抗劑(ji)有(you)相似效果，但它引(yin)起的下游生(sheng)物反(fan)應不同(tong)。反(fan)激(ji)(ji)動劑(ji)作用于本身有(you)基礎活性(xing)(xing)的受(shou)體(ti)，它不僅(jin)像普通的拮(jie)抗劑(ji)一樣阻(zu)礙激(ji)(ji)動劑(ji)與受(shou)體(ti)結合，而且還(huan)抑制了受(shou)體(ti)的基礎活性(xing)(xing)。這一發現使很多先前(qian)認為(wei)是(shi)拮(jie)抗劑(ji)的藥物被重(zhong)新劃(hua)分為(wei)反(fan)激(ji)(ji)動劑(ji)。例如抗組織胺藥先前(qian)認為(wei)是(shi)組織胺H1受(shou)體(ti)拮(jie)抗劑(ji)，重(zhong)新劃(hua)分為(wei)反(fan)激(ji)(ji)動劑(ji)。